(1) 取10mL預(yù)增菌液加入lOOmL亞硒酸鹽胱氨酸肉碭中,另取l0mL加入R-V (Rappaport - Vamliadis)培養(yǎng)基;用綏沖蛋白胨水對樣品進行預(yù)增菌,再將增菌液轉(zhuǎn)接到亞硒酸鹽胱氨酸肉湯中可用于分離志賀氏菌;但因志賀氏菌很容易被樣品中其他微生物抑制,因此最好不用預(yù)增菌,直接將25g樣品加人225mL的GN肉楊中進行選擇性增菌。
(2) 如果食品不需要非選擇復(fù)蘇,則可直接取25g樣品加人250mL亞硒酸鹽胱氨酸 肉湯;同時將5g食品加人500rnL R - V培養(yǎng)基中’另外將25g樣品加人250mL GN肉湯中進行增菌培養(yǎng)。注意在接種R-V培養(yǎng)基時,不能用1:10的常規(guī)接種比率,否則會削弱這種選擇培養(yǎng)基的有效性。
將亞硒酸鹽胱氨酸肉湯和肉湯在37培養(yǎng)48h.R- V培養(yǎng)基在42培養(yǎng)18? 24h,培養(yǎng)后在固體選擇培養(yǎng)基平板上劃線接種,R-V培養(yǎng)基再培養(yǎng)48h,然后冉次劃線接種到固體平板培養(yǎng)基。
Harvey和Price({968&1974)認(rèn)為將樣品加入亞硒酸鹽肉湯,43培養(yǎng)后,再在37 進行非選擇復(fù)蘇能較好地分離沙門氏菌。但在43時,經(jīng)加熱滅菌的亞硒酸鹽肉湯對沙門氏菌會產(chǎn)生毒性:所以,在制備培養(yǎng)基吋必須采用過濾滅菌。